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瑞德旋轉蒸發儀對忽地笑石蒜堿提取工藝優化的實驗

時間:2017-03-15 點擊:1029 次 來源:本站
 

瑞德旋轉蒸發儀對忽地笑石蒜堿提取工藝優化的實驗


復合酶法提取忽地笑石蒜堿的工藝優化的實驗,用陽離子交換樹脂分離石蒜堿。以纖維素酶與果膠酶的水溶液為提取溶劑,采用L9( 34 ) 正交試驗考察了酶解pH、酶加入量、酶解時間和酶解溫度等影響因素,以石蒜堿得率為指標,得*優提取工藝為:料液比1∶10,pH 4.5,酶添加量4%,酶解溫度50℃,提取時間2.0 h,石蒜堿得率為0.1750%。D-001樹脂純化條件為:上樣液pH為2,以3BV/h流速上樣,以含1 5 mol /L氨水的70%乙醇洗脫,流速為3BV/h,利用瑞德旋轉蒸發儀RE-5002初步分離后石蒜堿含量為15.28%。研究結果可為石蒜堿工業化生產提供參考。

 

        Agilent 1260**液相色譜儀;FD5-3型真空冷凍干燥機;RE-5002旋轉蒸發器;AEG-220 型萬分之一天平。

        1 實驗方法

        1.1 酶種類的選擇

        以石蒜堿得率為檢測指標,以忽地笑鱗莖粉末為提取物料,以pH 4.5 的水為提取劑,在料液比( g∶mL) 為1∶10條件下,分別加入3%的纖維素酶、半纖維素酶、果膠酶、纖維素酶與半纖維素酶復合酶、纖維素酶與果膠酶復合酶、半纖維素酶與果膠酶復合酶、纖維素酶與半纖維素酶及果膠酶復合酶,50℃浸提2.0h,5000rpm 離心20min,取上清液,定容至50mL,過0.45 μm濾膜后HPLC檢測。

        1.2 D001樹脂洗脫曲線

        D-001 陽離子樹脂對石蒜堿的動態洗脫曲線。洗脫至5BV時,石蒜堿基本洗脫完全,合并0~100mL 洗脫液,用瑞德旋轉蒸發儀蒸發后真空冷凍干燥,經HPLC檢測,石蒜堿的純度為15.28%。

        2 結論

        石蒜堿酶法提取的*優工藝條件為: 按料液比( g∶mL) 1∶10加入pH為4.5 的水作為提取溶劑,再加入4%的纖維素酶和果膠酶的復合酶,在50℃水浴提取2.0h,提取3次石蒜堿得率為0.1750%。石蒜堿得率影響的各因素為酶解溫度> 酶用量> 酶解時間> 酶解pH,酶解溫度對石蒜堿得率的影響顯著。通過對石蒜堿的分離純化研究,確定了*佳陽離子交換樹脂分離條件: 以D-001型陽離子交換樹脂進行石蒜堿分離,以3BV/h上樣至飽和,以含1. 5mol /L氨水的70%乙醇溶液3 BV/h 進行洗脫,洗脫液干燥物中石蒜堿的含量為15.28%。


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